A colecção é composta por diversos materiais relacionados directamente com a vida associativa, com a acção de beneficência que o Lactário desenvolveu desde o início do século XX, os principais acontecimentos da sua história, as personalidades que desempenharam cargos de gerência e os utentes auxiliados. O acervo integra diversas tipologias de objectos – ciência e técnica, pintura, escultura, azulejaria, fotografia e documentação arquivística –, constituindo uma importante fonte para o estudo da sua actividade e para a investigação sobre a assistência social na cidade de Lisboa.

O espaço museológico encontra-se organizado em duas áreas temáticas. Uma, dedicada à criação e ao fundador do Lactário, na qual é possível contactar com peças de pintura e escultura, bem como com documentos fundadores da instituição. Outra, estruturada em vários núcleos expositivos, onde se reconstituem os espaços dos antigos Serviços e se apresentam documentos e objectos relacionados com a respectiva actividade: Serviços de Lacticologia e de Lactário, Serviço Médico, Serviço Social, e Serviço Administrativo.